影片讲述了新生代蜘蛛侠迈尔斯(沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音)携手蜘蛛格温(海莉·斯坦菲尔德 Hailee Steinfeld 配音),穿越多元宇宙踏上更宏大的冒险征程的故事。面临每个蜘蛛侠都会失去至亲的宿命,迈尔斯誓言打破命运魔咒,找到属于自己的英雄之路。而这个决定和蜘蛛侠2099(奥斯卡·伊萨克 Oscar Is aac 配音)所领军的蜘蛛联盟产生了极大冲突,一场以一敌百的蜘蛛侠大内战即将拉响!
卡罗琳·劳伦斯,汤姆·肯尼,劳伦斯先生,玛丽·乔·卡特利特,克兰西·布朗,比尔·法格巴克,罗德格尔·邦帕斯,迪·布拉雷·贝克尔,Christopher Hagen,瑞欧·亚历山大,Ryan Begay,伊利娅·伊索雷利·保利诺,马修·卡德瑞普,旺达·塞克丝,吉尔·塔利,克雷格·罗宾森,格蕾·德丽斯勒,约翰尼·诺克斯维尔,凯瑞·华格伦,Miles Hall